Úvod do PCR strojů

PCR stroj , známý také jako přístroj amplifikace genu PCR, amplifikační přístroj PCR, amplifikační přístroj pro amplifikaci nukleázy polymerázové řetězové reakce, je přístrojem, který zesiluje specifickou DNA pomocí technologie PCR (polymerázová řetězová reakce). PCR stroj se široce používá v lékařských a biologických laboratořích, například pro stanovení, zda testovací tělo bude vykazovat stroje PCR, se široce používají v lékařských a biologických laboratořích, například k určení, zda testovací organismus vykazuje profil genetických onemocnění, k diagnostice infekčních onemocnění, replikaci genů a identifikaci rodičovství. Co je to stroj PCR?

Zde je seznam obsahu:

l Základní struktura stroje PCR

l Pracovní princip stroje PCR

l Kinetika reakce PCR strojů

Základní struktura stroje PCR

Stroj PCR obvykle sestává z horkého krytu, části tepelného cyklu, přenosové části, kontrolní části a napájecí část atd.

Pracovní princip stroje PCR

Pracovní princip stroje PCR je podobný procesu přirozené replikace DNA, jehož specificita závisí na oligonukleotidových primerech komplementárních na obou koncích cílové sekvence a sestává ze tří základních reakčních kroků: denaturace-řádným roztažením.

1. denaturace šablony DNA

Šablona DNA je zahřívána na asi 93 ° C na určitou dobu, aby se disociatovala dvouřetězcová šablona DNA nebo dvouřetězcovou DNA vytvořenou PCR strojem, aby byla jednovláknová, aby se mohla vázat na primery při přípravě na další kolo reakce.

2. žíhání (denaturace) šablony DNA a primerů

Poté, co je templát DNA denaturována na jednovláknové zahřívání, je teplota snížena na přibližně 55 ° C a primery jsou spárovány a vázány na jednovláknovou komplementární sekvenci templátové DNA.

3. rozšíření primerů

Konjugát DNA-Primer-Primer je syntetizován působením taqDNA polymerázy, za použití DNTP jako reakčního materiálu a cílového sekvence jako šablony, aby se syntetizoval nový semi-konzervovaný replikovaný řetězec komplementární k řetězci templátu DNA.

Opakováním procesu prodloužení denaturace-ennealingu lze získat více 'polo-konzervovaných replikačních řetězců ' a tyto nové řetězce lze použít jako šablony pro další cyklus.

Dokončení každého cyklu trvá 2 ~ 4 minuty, a tak se opakovaně může DNA produkovaná v každém cyklu stát šablonou pro další cyklus a každý cyklus zesiluje počet kopírovacích počtu DNA specifických oblastí mezi dvěma syntetickými primery 1krát a PCR strojový produkt se rychle zesiluje v exponenciální formě 2. 109krát po 25 ~ 30 kolech (2 ~ 3 hodiny) a v praxi může obecně dosáhnout 106 ~ 107krát.

Reakční kinetika stroje PCR

Tři reakční kroky stroje PCR se opakují, což má za následek exponenciální zvýšení množství amplifikace DNA. Konečná amplifikace reakce DNA lze vypočítat pomocí y = (1+x) n. Y představuje počet kopií amplifikovaného fragmentu DNA, X představuje průměrnou účinnost amplifikace na amplifikaci a N představuje počet cyklů. Teoretická hodnota průměrné účinnosti amplifikace je 100%, ale v rané fázi skutečné reakce je zvýšení cílové sekvenční fragment DNA exponenciální a s postupným akumulací PCR strojových přípravků, amplifikovaná fragment DNA již nezvyšuje, ale průměrná účinnost účinnosti pcr, ie, tj. Stroj PCR nedosáhne teoretické hodnoty.

Bioteke Corporation, která se zaměřuje na molekulární diagnostiku a rychlou detekci, zejména na extrakci nukleových kyselin, je profesionální high-tech výrobce a PCR stroje. Je zasazen do města Wuxi, provincie Jiangsu, Čína. Těšíme se na spolupráci s vámi.