Detekční sada pro detekci genotypování lidského papilomaviru (HPV) (metoda fluorescence PCR)

A. Zamýšlené použití

• Tato souprava se používá pro kvalitativní detekci vysoce rizikového a nízkorizikového lidského papilomaviru (HPV).

• Vysoce rizikový HPV zahrnuje typ 16,18,26,31,33,35,39,45,51,53,56,58,59,66,68,73,82;  

• HPV s nízkým rizikem zahrnuje typ 6,11,40,42,43,44/55,54,57/71,61,70,72,81,84.

B. Princip

• Toto činidlo je multiplexní fluorescenční sondu TAQMAN® QPCR Assay System.

• Specifické primery a sondy jsou určeny pro detekci různých typů lidského papilomaviru (HPV).

• Vnitřní kontrola (IC) se používá jako metoda monitorování, aby se zabránilo výsledkům falešných negativních testů.

• Systém enzymu/DUTG UDG je přidán k degradování amplifikačního produktu, aby se zabránilo falešně pozitivním výsledkům.

• Tato sada je plně předem předem relixovaným lyofilizovaným systémem. Taq enzym, enzym UDG, reakční pufr, specifické primery a sondy byly předem umístěny v činidlech.

C. Komponenty

Coponenti	8 vzorků/soupravy	24 vzorků/soupravy	Přísada
Lyofilizované činidlo HP04	8 × 8 trubic	Trubky 24 × 8	Specifické primer a sondy pro detekci cílových patogenů, směsi DNTP/DUTP, MG2+, TAC Polymeráza a UDG enzym
HPV lýzový pufr	1 ml × 1 trubice	2,5 ml × 1 trubice	Povrchové aktivní činidlo, vyvážený roztok soli
HPV pozitivní kontrola	400 ml × 1 trubice	400 ml × 1 trubice	Plazmid obsahující každou sekvenci cílového genu
Negativní kontrola HPV	400 ml × 1 trubice	400 ml × 1 trubice	Plasmid obsahující sekvenci vnitřní kontroly
Rozpuštění roztoku	1 ml × 1 trubice	1 ml × 3 trubice	Stabilizátor

D. Životnost skladování a skladu

1). Přeprava při teplotě místnosti pod 37 ℃ (＜ 1 měsíc).

2). Uloženo při -20 ℃ ± 5 ℃ po dobu 1 roku.

3). Opakované zmrazení a rozmrazení by neměly překročit 7krát.

E.  Přehled procesu testování

F. Amplifikace PCR

1. Vložte reakční zkumavky do přístroje PCR a nastavte názvy každé reakce dobře v odpovídajícím pořadí.

2. Vyberte FAM, VIC/Hex, Rox a Cy5 čtyři fluorescenční kanály pro detekci.

   
   

   
   

Umístění	Fam	VIC/HEX	Rox	Cy5
No 1	HPV typ 16	HPV typ 18	HPV typ 26	Vnitřní kontrola (IC)
Č. 2	HPV typ 31	HPV typ 33	HPV typ 35	HPV typ 39
No 3	HPV typ 45	HPV typ 51	HPV typ 52	HPV typ 53
4	HPV typ 56	HPV typ 58	HPV typ 59	HPV typ 68
No 5	HPV typ 66	HPV typ 73	HPV typ 82	HPV typ 81
No 6	HPV typ 6	HPV typ 11	HPV typ 40	HPV typ 42
7	HPV typ 43	HPV typ 44/55	HPV typ 54	HPV typ 61
No 8	HPV typ 57/71	HPV typ 70	HPV typ 72	HPV typ 84

G.  Analýza a interpretace výsledků

Viz uživatelská příručka.

H. Specifikace výkonu

1. Omezení detekce: 1000 kopií/ml

2. Precision: Variační koeficient (CV,%) hodnoty CT v rámci přesměru/mezi šarží je ≤ 5%.

3. AKCURACICE: Míra shody negativního/pozitivního odkazu: 100%.

4. Specificita: Fargetové organismy byly analyzovány v siliku pro potenciální zkříženou reaktivitu pomocí primerů nebo sekvencí sondy.

Homologie s jinými druhy je vše pod 80%.

Analýza specifičnosti ukázala, že neexistuje žádná křížová reakce s Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Gardnerella vaginalis, hemophilus ducreyi, candida albicans, streptococcus agalactiae, ureaplazma urealyticum, ureoplasma homoninis, mycoplasma homoninis, mycoplasma hominis, ureaplasma urealyticum, ureaplasma urealyticum, ureaplasma urealyticum, ureaplasma urealyticum. Genitalium, treponema pallidum, virus herpes simplex typu 1 a 2.

I. Možná se vám bude líbit